Nöropsikiyatri Arşivi; 2014;51(2):163-168
Vitamin D Uygulamasının Primer Hippokampal Nöronlardaki İndüklenebilir Nitrik Oksit Sentaz (İNOS) Anlatımı Üzerine Etkileri
E Dursun, DG Ak, S Yılmazer
İstanbul Üniversitesi, İstanbul
Giriş: Nörodejenerasyon, sinir hücrelerinin yapı ve fonksiyonlarını kaybetmesine bağlı
olarak nöron ölümü ile sonuçlanan bir süreçtir. Bu süreçte artan indüklenebilir nitrik
oksit sentaz (iNOS) seviyelerinin, hücrelerin oksidatif ve nitrozatif hasarına sebep olarak
nörodejenerasyona eşlik ettiği düşünülmektedir. Vitamin D’nin ise glia hücrelerinde iNOS
sentezini baskılayarak hücreleri nörotoksisiteye karşı koruduğu ileri sürülmektedir. Ancak
iNOS’un hippokampal nöronlarda vitamin D tarafından düzenlenip düzenlenmediğini
gösteren herhangi bir çalışma yoktur. Bu çalışmadaki amacımız, hippokampal nöronların
vitamin D uygulamasına cevap olarak iNOS anlatımlarında bir değişiklik olup olmadığını
belirlemektir.
Yöntem:
Sprague dawley cinsi sıçanların 18 günlük embriyolarının hippokampuslarından
hazırlanan primer nöron kültürlerine 24 ve 48 saat süre ile vitamin D uygulandı. iNOS
mRNA miktarlarındaki değişimler kantitatif gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu
(qRT-PCR) yöntemi ile belirlendi. Tüm grupların sitotoksisite seviyeleri kültür medyumuna
salınan laktat dehidrogenazın (LDH) ölçülmesi ile belirlendi.
Bulgular:
Yirmi dört saat boyunca vitamin D uygulanan grupla diğer gruplar arasında
herhangi bir iNOS anlatımı açısından bir fark gözlenmezken, 48 saat süreyle vitamin D
uygulanan hippokampal nöronların iNOS mRNA seviyelerinin kontrol gruplarına kıyasla
anlamlı derecede düştüğü saptandı (p<0,001). Ayrıca, vitamin D uygulamasının sitotoksiste
belirteci olan LDH salınımını da azalttığı saptandı (p<0,001).
Sonuç:
Sonuçlarımız, vitamin D’nin iNOS anlatımındaki artışı engelleyerek,
hippokampal nöronları oksidatif hasara karşı koruyabileceğini göstermektedir
The Influence of Vitamin D Treatment on the Inducible Nitric Oxide Synthase (INOS) Expression in PrimaryHippocampal Neurons
Introduction: Neurodegeneration is a process that is characterized by the loss of
neuronal structure and function and eventually ends with neuronal death. An elevated
level of inducible nitric oxide synthase (iNOS) is suggested to accompany this process
by inducing oxidative and nitrosative damage. Vitamin D is reported to protect glial
cells against neurotoxicity via suppressing iNOS synthesis. Though there was no data
about whether iNOS is regulated by vitamin D in hippocampal neurons. In this study
our aim was to determine any alteration in iNOS expression of hippocampal neurons in
response to vitamin D treatment.
Method:
Twenty four and 48 hours of vitamin D treatments were performed on primary
hippocampal neuron cultures that were prepared from Sprague dawley rat embryos
(E18). The alterations in the iNOS mRNA expression were determined with quantative
real time polymerase chain reaction (qRT-PCR). The cytotoxicity levels of each group
were investigated by the measurement of lactate dehydrogenase (LDH) that is released
to culture medium.
Results:
No difference was observed between groups in 24 hours of treatment
regarding the iNOS expression. Though the iNOS mRNA level of vitamin D treated
group was significantly lower than that of control group on the 48th hours of treatment
(p<0.001). Vitamin D treatment also attenuated the LDH release which is an indicator of
cytotoxicity (p<0.001).
Conclusion:
Our results indicated that vitamin D has the potential to prevent oxidative
damage by suppressing iNOS expression.